fa بهبود تولید PRP هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b با استفاده از محیط کشت CY اصلاح شده در مقیاس نیمه صنعتی ميكروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و هدف : </b>همـوفیلوس آنفلوانزا، نوعی باسیل گرم منفی است که سویه های مختلف آن در دو گروه کپسول دار و بدون کپسول طبقه بندی شده اند. هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ، یکی از عوامل شایع مننژیت نوزادان و کودکان زیر 5 سال در سراسر جهان می باشد که از کپسول پلی ساکاریدی آن موسوم به پلی ریبوزیل ریبیتول فسفات ( PRP ) جهت تولید واکسنهای کونژوگه گلیکوپروتئینی علیه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b استفاده شده است. هدف از انجام این مطالعه، بهبود شرایط کشت هموفیلوس آنفلوانزا به منظور افزایش تولید PRP در مقیاس نیمه صنعتی است. <br> <b>مواد و روش ها:</b> سویه استاندارد هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ابتدا در فرمانتورهای 2 لیتری حاوی محیط CY (کازآمینواسید- عصاره مخمر) با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده گلوکز، عصاره مخمر، Hemin و NAD (نیکوتینامید آدنین دی نوکلئوتید) کشت داده شد و سپس بذر تلقیحی بطور مجزا وارد فرمانتور 50 لیتری با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده مواد فوق گردید. پس از هربار فرمانتاسیون، میزان توده سلولی و تولید PRP مورد بررسی قرار گرفت. <br><b>نتایج:</b> با استفاده از محیط کشت CY (کازامینواسید- عصاره مخمر) اصلاح شده ( گلوکز : 6 ، عصاره مخمر : 5/2، Hemin : 03/0 و 015/0 NAD : گرم برلیتر) و فرمانتاسیون در فرمانتور 50 لیتری ، وزن خشک سلولی و غلظت PRP بترتیب به حدود 2/5 و 1/1 گرم برلیتر رسید که در مقایسه با محیط کشت CY معمولی ، بطور معنی داری افزایش نشان میداد. نتیجه گیری : در مجموع ، استفاده از محیط کشت CY اصلاح شده ، در کنار کنترل pH و اکسیژن محلول ، موجب افزایش و بهبودتولید PRP می گردد که بالطبع ، کاهش هزینه های تولید و در نتیجه ، کاهش قیمت تمام شده واکسنهای کونژوگه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b را به دنبال دارد. </div> <b>Background and Objective</b>: Haemophilus influenzae type b (Hib) is a gram negative bacterium and one of the most common causative agents of acute meningitis in infants and less than 5 years old children worldwide. The production of Hib capsular polysaccharide polyribosyl ribitolphosphate (PRP) is important for the production of conjugate vaccines against Hib infections. The aim of this study is the improvement of Large-scale PRP production by Hib. <br> <b>Materials and Methods:</b> Haemophilus influenzae type b standard strain ATCC10211 was cultivated in 2L fermentors contain 1.5L CY (casaminoacid yeast extract) medium with normal or modified concentrations of glucose, yeast extract, hemin and NAD (nicotinamide adenine dinucleotide). Seed culture of two fermentors was inoculated to 50 L fermentor, separately and range of PRP production and Dry cell weight (DCW) were studied. <br> <b>Results:</b> Cultivation of Hib in 50L fermentor contained modified CY medium with 6gl-1 Glucose, 2.5 gl-1 Yeast extract, 0.03 gl-1 Hemin and 0.015 gl-1 NAD , with controlled pH at 7.3 and 30% Dissolved oxygen tension (DOT) resulted to about 5.1 gl-1 DCW and 1.16 gl-1 PRP , that was significantly higher than normal CY medium. <br><b>Conclusion:</b> In conclusion, by modification in some medium components of CY medium, control of Dissolved oxygen tension and pH, the Large-scale production of PRP is improved. Improvement of PRP production leads to reduce the final cost of Hib conjugate vaccines. هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b ، پلی ریبوزیل ریبیتول فسفات ، محیط CY ، گلوکز ، عصاره مخمر Haemophilus influenzae type b, PRP,CY medium, Glucose, Yeast extract 182 186 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-58&slc_lang=fa&sid=1 اشرف محبتی مبارز mmmobarez@modares.ac.ir 1003194753284600773 1003194753284600773 Yes Farshad Nojoomi فرشاد نجومی 1003194753284600774 1003194753284600774 No Seyed Davar Siadat سید داور سیادت 1003194753284600775 1003194753284600775 No Ali Hatef Salmanian علی هاتف سلمانیان 1003194753284600776 1003194753284600776 No Nima Khoramabadi نیما خرم آبادی 1003194753284600777 1003194753284600777 No