fa بررسی مقایسه‌ای ژن‌های کارباپنمازهای تیپ‌های KPC، VIM، NDM وIMP در ایزوله‌های بالینی و محیطی سودوموناس آئروژینوزا با پروتکل یکسان در روش Real Time PCR ميكروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">تولید آنزیم‌های کارباپنمازی در ایزوله‌های </span></span><em><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">سودوموناس آئروژینوزا</span></span></em><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> جداشده از بالین، درمان عفونت‌های ناشی از این باکتری را به چالش کشانده است و با توجه به زیستگاه طبیعی این باکتری در محیط‌های آبی و خاکی، این مطالعه در نظر داشت ژن‌های کارباپنمازی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">KPC</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">VIM</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">NDM</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">IMP </span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;را با پروتکل یکسان برای چهار ژن فوق با روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در ایزوله‌های بالینی و محیطی مورد مقایسه قرار دهد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></strong> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">ایزوله‌های بالینی از دو بیمارستان تبریز و ایزوله‌های محیطی از آب رودخانه‌های نهند و اسپیران جدا شد. جهت تعیین هویت ژنوتیپی آن‌ها، از پرایمر یونیورسال </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">16s rRNA</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده شد. با روش فنوتیپی دیسک دیفیوژن آگار و دیسک ترکیبی ازنظر تولید کارباپنمازها موردبررسی واقع شدند و با استفاده از پرایمر های اختصاصی برای ژن‌های موردنظر، مورد آزمون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Real- time PCR</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> واقع شدند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج:</span></span></strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با روش فنوتیپی 3/83% ایزوله‌های بالینی و 0% از ایزوله‌های محیطی مولد کارباپنمازها بودند. درحالی‌که با روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Real- time PCR</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> هم ایزوله‌های بالینی و هم محیطی ژن‌های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bla</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"> _NDM-1</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bla</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"> _IMP</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bla</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"> _KPC</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">bla</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"> _VIM</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> را نشان دادند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری</span></span></strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">: این مطالعه نشان داد که ژن‌های کارباپنمازی با یک پروتکل یکسان برای چهار ژن</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">KPC</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">VIM</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">NDM</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">IMP </span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;قابل‌بررسی در ایزوله‌های بالینی و محیطی است و وجود ژن‌های فوق در ایزوله‌های محیطی علاوه بر ایزوله‌های بالینی اهمیت پخش این ارگانیسم را به‌عنوان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Super bug</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> را بیش‌ازپیش روشن می‌سازد.</span></span><br> &nbsp;</div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background and objectives</strong>: Production of Carbapenemase enzymes in <em>Pseudomonas aeruginosa</em> isolated from clinic, has challenged the treatment of these infections and due to its natural habitat in soil and aquatic environments. This study aimed to compare carbapenemase resistance genes (VIM, KPC, NDM and IMP) using similar protocol for the four above-mentioned genes in clinical and enviromemtal isolates by Real-Time PCR.<br> <strong>Materials and Methods</strong>:&nbsp; The clinical isolates were isolated from two Tabriz Hospitals and environmental isolates from Nahnad and Spiran rivers. For their genotypic idententification we used universal primer of 16s rRNA. They were investigated for Carbapenemase production via phenotypic disk agar diffusion and combined disk methods and then Real-Time PCR was conducted using specific primers for the above-mentioned genes.<span dir="RTL"></span><br> <strong>Results:</strong> By phenotypic methods, 83.3 percent of clinical and 0% of environmental isolates were Carbapenemase producers. However. both clinical and environmental isolates showed <em>bla</em>_NDM-1, <em>bla</em>_IMP, <em>bla</em>_KPC and <em>bla</em>_VIM genes by Real-Time PCR.<br> <strong>Conclusion:</strong> This study showed that the carbapenemase enzymes&rsquo; genes in clinical and environmental isolates were checked for four KPC, VIM, NDM and IMP genes by similar protocol and the presence of above genes in environmental isolates. Furthermore, clinical ones revealed the possibility of bacteria spreading as a superbug increasingly. <span dir="RTL"></span></div> کارباپنمازها, پسودوموناس آئروژینوزا, آب رودخانه, مقاومت ضد میکروبی Carbapenemases, Pseudomonas aeruginosa, River Water, Antimicrobial resistance 2308 2316 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2325-1&slc_lang=fa&sid=1 Jafar Babaei جعفر بابایی J.babaei@gmail.com 5458969251 100319475328460021996 No Department of Basic Science, Tabriz Branch, Islamic Azad University, Tabriz, Iran دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز گروه علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز، تبریز، ایران Haedeh Mobaiyen هائده مبین drhmobaiyen@gmail.com 1372694511 100319475328460021997 Yes Department of Microbiology, Tabriz Branch, Islamic Azad Uniersity, Tabriz, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز، تبریز، ایران Amir Mehdi Khameneh امیر مهدی خامنه khamanehamir@gmail.com 1375662791 100319475328460021998 No Department of Molecular Medicine, Tabriz University of Medical Science,Tabriz, Iran گروه پزشکی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران