Journal of Advanced Biomedical Sciences
مجله علوم زیست پزشکی پیشرفته
J Adv Biomed Sci.
Medical Sciences
http://jabs.fums.ac.ir
1
admin
2783-1523
8
7
14
8888
13
en
jalali
1397
9
1
gregorian
2018
12
1
8
4
online
1
fulltext
fa
بررسی اثرات سلولهای ماکروفاژ رده RAW264.7 تیمار شده با ملاتونین بر روی سلولهای سرطانی رده اریترولوکمی K562
Investigating the effects of RAW264.7 macrophages treated with melatonin on the erythroleukemia cell line K562
ايمونولوژي
Immunology
پژوهشي
Research
<p dir="RTL"><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">: ماکروفاژها تحت تأثیر ریز محیط، عملکردهای متنوع و بهتبع آن فنوتیپ­های گوناگونی را نشان می­دهند. از طرفی ملاتونین به لطف عملکردهای چندگانه­­ می­تواند سبب توسعه سرطان و یا محدودیت رشد سرطان در هماهنگی با دیگر فاکتورها شود. بااینحال، هیچ اطلاعاتی در مورد نقش ملاتونین در شکل دادن به ماکروفاژها در محیط تومور وجود ندارد. هدف این مطالعه تعیین اثر سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">­</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">های ماکروفاژ تیمار شده با ملاتونین بر روی سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">­</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">های سرطانی رده </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">K562</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">. است.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش­ها:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> برای این منظور سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RAW264.7</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در پلیت 24 خانه با تراکم سلولی 10<sup>4</sup>× 6 برای 24 ساعت کشت داده شدند. سلول­ها با غلظت­های صفر، 50، 75، 100، 150 و 200 میکرومولار ملاتونین به مدت 24 ساعت تیمار شدند. سپس سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">K562</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با نسبت 1: 10 به سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RAW264.7</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تحت تیمار اضافه شدند. قدرت زنده­مانی سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">K562</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">MTT</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NR</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تعیین شد و میزان آپوپتوز و نکروز در این سلولها بهوسیلهی رنگآمیزی با آکریدین اورنج و اتیدیوم برماید ارزیابی گردید. همچنین میزان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">MPO</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NO</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RAW264.7</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تیمار شده با ملاتونین موردسنجش قرار گرفت. داده­ها با استفاده از آزمون کراسکال والیس و من ویتنی مورد ارزیابی قرار گرفتند (05/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">P<</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">).</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">: میزان رشد و زنده­مانی سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">K562</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در مجاورت سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RAW264.7</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تحت تیمار با ملاتونین در غلظت­های 50 و 75 میکرومولار افزایش یافت. هرچند در غلظت­های بالاتر این روند تغییر یافت. میزان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">MPO</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NO</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> نیز با افزایش غلظت ملاتونین کاهش یافت.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه ­گیری</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">: نتایج حاکی از افزایش قابلتوجه میزان زندهمانی و سایر قابلیت­های حیاتی سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">K562</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در مجاورت سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RAW264.7</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تحت تیمار با غلظت­های پایین ملاتونین است.</span></span><br>
</p>
<p dir="RTL"></p>
<p><strong><em>Background & Objectives:</em></strong> Macrophages have a variety of functions and different phenotypes that are affected by the microenvironment. Due to the multiple functions, Melatonin can promote the cancer progression or cancer regression in relation to other factors. However, there is no information about the role of melatonin on the formation of macrophages in the tumor environment. The purpose of the present study is to evaluate the effects of melatonin treated RAW264.7 macrophages on the growth rate of erythroleukemia cell line K562.<br>
<strong><em>Materials & Methods:</em></strong> RAW264.7 cells were cultured in the 24-well plates at a density of 6 × 10<sup>4</sup> cells per well. After culturing for 24 h, the cells were treated for 24 h with melatonin at concentrations 0, 50, 75, 100, 150, 200 μmol/L. After removal of the supernatant, macrophages and K562 were co-cultured in 1:10 ratio. K562 vitality was then determined by MTT and NR assay. The rate of apoptosis in the cell population was evaluated by staining with acridine orange and ethidium bromide colors. Also, NO and MPO were measured in the supernatant of macrophages RAW264.7. Data were statistically analyzed using Kruskal-Wallis and Mann–Whitney U test (P<0.05).<br>
<strong><em>Results:</em></strong> The growth rate and vitality of K562 cells co-cultured with melatonin-treated macrophages was increased at concentrations of 50 and 75 μmol/L. Nevertheless, at higher concentrations of melatonin, this process was reversed. The levels of MPO and NO were decreased by increasing concentrations of melatonin.<br>
<strong><em>Conclusion:</em></strong> These results indicated that treatment of macrophage with melatonin, especially at lower doses (50 and 75μmol/L) could remarkably increase the K562 viability and vitality.</p>
<p></p>
سیتوتوکسیتی, ماکروفاژ رده RAW264.7, ملاتونین, K562
Cytotoxicity, Melatonin, RAW264.7 Macrophage, K562
1012
1024
http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1885-1&slc_lang=fa&sid=1
masoumeh
Ahanjan
معصومه
آهنجان
mmasumeh.ahanjan@gmail.com
4501169362
100319475328460018994
Yes
Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran
گروه میکروبشناسی، بخش ایمنیشناسی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران
meysam
Abtahi Froushani
سیدمیثم
ابطحی فروشانی
meysamabtahi@hotmail.com
100319475328460018995
100319475328460018995
No
Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran
گروه میکروبشناسی، بخش ایمنیشناسی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران
N.A
Afzal Ahangaran
ناهیده
افضل آهنگران
n.a.ahangran@gmail.com
100319475328460018996
100319475328460018996
No
Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran
بخش ایمنیشناسی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران