fa بررسی تغییرات متیلاسیون راه‌انداز ژن ویمنتین در سرطان پستان ژنتيك پزشكي Medical Genetics پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b nazanin;">زمینه و هدف</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">: تغییرات اپی</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">ژنتیکی از رایج</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">ترین تغییرات در ایجاد انواع سرطان</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">هاست. این تغییرات در سلول باعث کاهش یا افزایش بیان ژن&shy;های خاصی می‌شوند که در سبب</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">شناسی سرطان نقش مهمی دارند. افزایش بیان ژن ویمنتین به علت تغییرات اپی&shy;ژنتیکی در انتقال از مرحله اپیتلیال به مزانشیمال (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">EMT</span></span><span style="font-family:b nazanin;">) در سرطان پستان به‌خوبی مشخص شده است. ویمنتین نشانگر اصلی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">EMT</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> است که این وظیفه را از طریق افزایش بیان ژن&shy;های مرتبط با </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">EMT</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> در طی تهاجم انجام می&shy;دهد. هدف این تحقیق بررسی متیلاسیون راه&shy;انداز ژن ویمنتین در یک جایگاه مشخص است.</span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">مواد و روش&shy;ها</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">: در این مطالعه مورد-شاهدی الگوی متیلاسیون راه&shy;</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">انداز ژن ویمنتین در یک جایگاه خاص در افراد سالم و بیمار بررسی شد. خون&shy;گیری از 30 فرد مبتلا به سرطان پستان و 30 فرد سالم انجام شد. جهت بررسی متیلاسیون، از روش </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Restriction Enzyme PCR</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> استفاده گردید. </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> نمونه</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">ها مورد تیمار آنزیمی قرار گرفت. سپس واکنش زنجیره</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">ای پلیمراز جهت بررسی کیفی و واکنش زنجیره</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">ای پلیمراز زمان واقعی جهت بررسی </span><span style="font-family:b nazanin;">کمّی </span><span style="font-family:b nazanin;">متیلاسیون انجام شد.</span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">نتایج</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">: با استفاده از </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">value</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Ct</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> و</span><span style="font-family:b nazanin;"> فرمول </span><span style="font-family:b nazanin;">(⁽</span>^{<span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&Delta;</span></span>}^{<span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Ct</span></span>}^{<span style="font-family:b nazanin;">) 0.7-</span>}<span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">e</span></span><span style="font-family:b nazanin;">)= </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">Me</span></span><span style="font-family:b nazanin;">% متیلاسیون نمونه&shy;ها به دست آمد. در نرم&shy;افزار </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">SPSS</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> ارتباط متیلاسیون بابیان گیرنده</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">های استروژن </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(ER)</span></span><span style="font-family:b nazanin;">، پروژسترون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(PR)</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> و گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی انسانی 2 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(HER2)</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> بررسی شد.</span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">نتیجه&shy;گیری</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">: نتایج این تحقیق نشان می&shy;دهد که راه</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">انداز ژن ویمنتین در جایگاه موردبررسی به‌صورت قابل‌ملاحظه‌ای متیلاسیون خود را ازدست‌داده و با </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">ER</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> همبستگی داشته ولی با </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">PR</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">HER2</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> همبستگی ندارد</span><span style="font-family:b nazanin;"> (5/0 = </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">p</span></span></em><span style="font-family:b nazanin;">) </span><span style="font-family:b nazanin;">درنتیجه می&shy;توان متیلاسیون ژن ویمنتین در این جایگاه به‌عنوان یک نشانگر مولکولی پیشنهاد کرد.</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;"></span></span><br> &nbsp;<br> &nbsp; <strong>Background & Objective</strong><strong>:</strong> Epigenetic changes are one of the most common changes in development of cancers. These changes alter the expression of certain genes that play important roles in the etiology of cancer. Increasing the expression of Vimentin gene due to epigenetic changes in Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT) in breast carcinoma is well known. The relation between EMT and the malignancy invasion process has also been confirmed. Vimentin is the principal EMT marker that performs this task during metastasis. The purpose of this study is to investigate the methylation of the vitamin gene in a specific position.<br> <strong>Material & methods</strong><strong>:</strong> In this case-control study, the methylation pattern of the promoter of the Vimentin gene was evaluated in a specific site. Blood samples were taken from 30 breast cancer patients and 30 healthy individuals. DNA samples were digested with the methylation sensitive restriction enzyme. Control and treated DNA was amplified by PCR for qualitative investigation and real time PCR for quantitative analysis of methylation.<br> <strong>Results</strong><strong>:</strong> Using the Ct value and the%Me=100(e^{-0.7(&Delta;Ct)}) formula, the correlation between Vimentin hypomethylation and expression of Estrogen Receptor(ER), Progesterone Receptor(PR) and Human Epidermal growth factor Receptor2(HER2) status was checked (p-value <0.05).<br> <strong>Conclusion:</strong> The results indicate that hypomethylated promoter of the Vim gene in the examined site correlates with ER, but does not have any correlation with PR and Her2, and hence the hypomethylation of the Vimentin gene in this position can be proposed as a molecular biomarker سرطان پستان, متیلاسیون, ویمنتین, هضم آنزیمی, واکنش زنجیره‌‌ای پلیمراز زمان واقعی Breast cancer, Methylation, Vimentin, Restriction Enzyme PCR, Real Time PCR 770 777 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1658-1&slc_lang=fa&sid=1 Nahid Nejat ناهید نجات 100319475328460017671 100319475328460017671 No Department of cell and molecular biology, Faculty of biological sciences, kharazmi university, Tehran, Iran دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران Seyed Ahmad Aleyasin احمد آل یاسین sogand@nigeb.ac.ir 100319475328460017672 100319475328460017672 Yes Medical Biotechnology Division, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Iran آزمایشگاه ژنتیک پزشکی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‌فناوری، تهران، ایران Seyed Abdolhamid Angaji سید عبدالحمید انگجی 100319475328460017673 100319475328460017673 No Department of cell and molecular biology, Faculty of biological sciences, kharazmi university, Tehran, Iran دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران Saied Ayerian سعید آیریان 100319475328460017674 100319475328460017674 No Department of cell and molecular biology, Faculty of biological sciences, kharazmi university, Tehran, Iran دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران