fa اثر مهاری کورکومین بر فسفریلاسیون NFκB-p65 القاشده توسط هیدروژن پراکسید در سلول‌های اندوتلیال آئورت گاوی بيوشيمي بالینی Biochemistry پژوهشي Research <p><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NF&kappa;B</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> یک فاکتور هسته‌ای دایمر و دارای چندین زیرواحد است. </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">p65</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> یکی از زیرواحدهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NF&kappa;B</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> است که فسفریلاسیون آن در اثر استرس اکسیداتیو به فعال شدن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NF&kappa;B</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> منجر می‌گردد. عدم تعادل میان استرس اکسیداتیو و ظرفیت آنتی‌اکسیدانی در پاتوژنز بسیاری بیماری‌ها مشارکت می‌کند. استفاده از ترکیبات آنتی‌اکسیدانی می‌تواند به‌عنوان استراتژی پیشگیری بیماری‌های التهابی موردتوجه قرار گیرد. از میان ترکیبات آنتی‌اکسیدانی کورکومین یک ترکیب طبیعی پلی فنول بوده که از زردچوبه استخراج و خنثی‌کننده‌ی رادیکال‌های آزاد است که بدن را از استرس اکسیداتیو محافظت می‌کند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول‌های اندوتلیال آئورت گاو با غلظت‌های متفاوت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&nbsp;H₂O₂</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&mu;M</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> 200، 80، 20، 10) تیمار گردیدند و در غلظت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">M</span></span></span><span style="font-size:10.0pt;">&mu;</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">200 افزایش فسفریلاسیون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">p65</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> مشاهده شد. سپس</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">جهت بررسی اثر مهاری کورکومین بر فسفریلاسیون القاشده توسط </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">H₂O₂</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول‌ها با غلظت‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&mu;M</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">5، 10</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">کورکومین انکوبه گردیدند.</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">غلظت پروتئین با روش برادفورد اندازه‌گیری و میزان فسفریلاسیون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">p65</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با روش وسترن بلات ارزیابی شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> یافته‌های ما نشان می‌دهد که میزان فسفریلاسیون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">p65</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> به دنبال تیمار با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">H₂O₂</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در غلظت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&mu;M</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">200 در مقایسه با کنترل به میزان حدود 2 برابر افزایش نشان داد و این اثر افزاینده </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">H₂O₂</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> پس از 30 دقیقه (03/0: </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">P</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) و 2 ساعت (015/0:</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">P</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) تیمار در غلظت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&mu;M</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">10 کورکومین کاهش یافت.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که یکی از مکانیسم‌های ضدالتهابی کورکومین از طریق مهار فسفریلاسیون زیر واحد </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">p65</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و مسیر </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">NF&kappa;B</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> است.</span></span></p> <p><strong>Background & Objective<em>:</em></strong> NF&kappa;B is a dimeric transcription factor with multiple subunits. Phosphorylation of&nbsp; p65 (one of NF&kappa;B subunits) by oxidative stress leads to the activation of NF&kappa;B. Imbalance between oxidative stress and cellular antioxidant capacity is the pathogenesis of many diseases. Consuming antioxidants in daily meal can be considered as a preventive strategy for inflammatory diseases. Among antioxidant components, curcumin is a natural polyphenol which is extracted from Tumeric. Curcumin can protect the human body from oxidative stress by neutralizing the free radicals.<br> <strong>Material & Methods: </strong>Bovine Endothelial Cells (BECs) were treated with different concentration of H₂O₂(10, 20, 80, 200 &mu;M). To investigate the inhibitory effect of curcumin on H₂O₂mediated phosphorylation of p65_,BECs were incubated with 5 and 10&mu;M concentration of curcumin. Protein concentration was measured by Bradford method and phosphorylation of p65 was assessed by western blotting.<br> <strong>Results:</strong> Our finding indicated that p65 phosphorylation was increased two fold in presence of H₂O₂(200 &mu;M) in comparison with control. The enhancing effect of H₂O₂ on p65 phosphorylation decreased at 30 min (P: 0.03) and 2 hours (P:0.015) after treatment with 10 &mu;M dose of curcumin.<br> <strong><em>Conclusion:</em></strong> The result of this study indicates that one of anti-inflammatory mechanisms of curcumin is through NF&kappa;B pathway by inhibition of p65 subunit phosphorylation.<br> &nbsp;<br> &nbsp;</p> کورکومین, هیدروژن پراکسید, فاکتور رونویسی کاپا B, سلول‌های اندوتلیال آئورت گاوی, فسفریلاسیون p65 Curcumin, hydrogen peroxide, transcription factor κB, bovine aortic endothelial cells 283 290 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1278-1&slc_lang=fa&sid=1 Narges Sharifat نرگس شریفات sharifatnarges@yahoo.com 100319475328460017900 100319475328460017900 No Student Research Committee, Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی‌شاپور اهواز، اهواز، ایران Farideh Jafari-Hafshejani فریده جعفری هفشجانی fajafari66@yahoo.com 100319475328460017901 100319475328460017901 No Department of Biochemistry, Falavarjan branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran گروه بیوشیمی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان، اصفهان، ایران Parisa Dayati پریسا دایتی parisa_dayati@yahoo.com 100319475328460017902 100319475328460017902 No Student Research Committee, Faculty of Paramedical, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی‌شاپور اهواز، اهواز، ایران Parastoo Lorestanpoor پرستو لرستان پور 100319475328460017903 100319475328460017903 No Department of Biochemistry, Falavarjan branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran گروه بیوشیمی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان، اصفهان، ایران Ali Paydar علی پایدار 100319475328460017904 100319475328460017904 No Student Research Committee, Faculty of Paramedical, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی‌شاپور اهواز، اهواز، ایران Hossein Babaahmadi Rezaei حسین بابااحمدی رضایی hbabaahmadi@gmail.com 100319475328460017905 100319475328460017905 Yes 4- Hyper lipidemia Research Center, Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات هایپر لیپیدمی، گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی‌شاپور اهواز، اهواز، ایران