fa طراحی واکنش زنجیره‌ای پلی مراز جهت تشخیص مولکولی باکتری‌های عامل اصلی پریودنتایتیس ميكروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> بیماری پریودنتال باعث بیماری التهابی در دهان و دندان می‌شود که ممکن به‌صورت حاد یا مزمن به بخش‌های بافت‌های نرم و سخت دندان آسیب برساند. هدف از این مطالعه طراحی تکنیک </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> برای تشخیص این عوامل است.</span></span></span><br> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR" style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">:</span></span></span></strong>&nbsp; <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">طراحی پرایمرهای اختصاصی برای هر یک از این عوامل باکتریایی </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Aggregatibacter actinomycetemcomitans</span></span></span></em><em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Porphyromonas gingivalis</span></span></span></em><em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Prevotella intermedia</span></span></span></em><em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Tannerella forsythensis</span></span></span></em><em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Treponema denticola</span></span></span></em> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">انجام گردید. </span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">سپس برای هر باکتری پس از کلون کردن تست‌های حساسیت و اختصاصیت گذاشته شد.</span></span></span><span dir="LTR" style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج</span></span></span></span></strong><strong><span dir="LTR" style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">:</span></span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">بر اساس پرایمرهای اختصاصی برای باکتری‌های ژن </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">hbpA</span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Aggregatibacter actinomycetemcomitans</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، ژن </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">fimA</span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Porphyromonas</span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">gingivalis</span></span></span></em><em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">،</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> ژن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">16s rRNA</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> باکتری</span></span></span> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Prevotella intermedia</span></span></span></em> <span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">16s rRNA</span></span></span> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Tannerella</span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">forsythensis</span></span></span></em> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">ژن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">16s rRNA</span></span></span> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">Treponema</span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">denticola</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> به ترتیب </span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">باندهای 161</span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">bp</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، 162</span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">bp</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، 283 </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">bp</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، 250 </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">bp</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و 173 </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">bp</span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> بر روی ژل دیده شد و پس از کلونینیگ، تست‌های حساسیت و اختصاصیت انجام گرفت.</span></span></span><span style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span><br> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری<span style="background:#FAFAFA;">:</span></span></span></span></strong><span style="background:#FAFAFA;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> جهت </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">بررسی و تشخیص بیماری‌های پریودنتال با استفاده از تکنیک </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">، می‌توان با اختصاصیت و حساسیت بالا این عوامل را شناسایی کرد<span style="background:#FAFAFA;">.</span></span></span></span><br> &nbsp;</div> <div style="text-align: justify;"><strong><em>Background & Objective: </em></strong>Periodontal disease, which can become a chronic condition, is an inflammatory disease that upsets the soft and hard structures supporting the teeth. The aim of the present study was to design and develop an in-house PCR Method, to detect putative periodontitis-related bacterial pathogens.<br> <strong><em>Materials & Methods</em></strong>: The PCR method was launched using specific primers of the five bacteria including <em>Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia, Porphyromonas gingivalis</em> and <em>Treponema denticola</em>. Then, the sensitivity and specificity tests were performed for each bacterium after cloning.<span dir="RTL"></span><br> &nbsp;<strong><em>Results: </em></strong>Basic specific Primer: <em>hbp</em> <em>Aggregatibacter actinomycetemcomitans</em><span dir="RTL">، </span><em>fimA</em> <em>Porphyromonas</em><em> gingivalis</em><span dir="RTL">، </span>gene 16s rRNA <em>Prevotella</em> <em>intermedia</em> 16s rRNA <em>Tannerella</em> <em>forsythensis</em> gene and 16s rRNA <em>Treponema</em> <em>denticola</em> 161 bp<span dir="RTL">، </span>162 bp, 282 bp, 280 bp,173 bp and the sensitivity and specificity tests were performed for this gene.<br> <strong><em>Conclusion:</em></strong> In order to evaluate and diagnose periodontal diseases using PCR technique, these factors can be identified with high specificity and sensitivity.<span dir="RTL"></span><br> &nbsp;</div> واکنش زنجیره‌ای پلی مراز, پریودنتایتیس, تشخیص مولکولی Polymerase chain Reaction, Periodontal, Molecular diagnostics 2567 2577 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2134-2&slc_lang=fa&sid=1 mohammad soleimani محمد سلیمانی Abbas_200463@yahoo.com 100319475328460023006 100319475328460023006 No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارتش، تهران، ایران mohammadreza zolfaghari محمدرضا ذوالفقاری m.zolfaghari@gmail.com 100319475328460023007 100319475328460023007 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران abbas morovvati عباس مروتی abbasmorovvati@gmail.com 100319475328460023008 100319475328460023008 Yes Department of Microbiology, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران