fa تأثیر ویتامین E بر القاء کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه بيولوژي سلولی-مولكولي Cellular-Molecular Biology پژوهشي Research <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول&shy;های بنیادی اسپرماتوگونی، سلول&shy;های زایای غیر متمایزی هستند که در طی مرحله پس از بلوغ با حفظ تعادل بین خود نوسازی و تمایز، سبب حفظ اسپرماتوژنز در طول حیات موجود می&shy;شوند. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر غلظت&shy;های مختلف ویتامین </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">E</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> روی کلونی‌زایی سلول&shy;های بنیادی اسپرماتوگونی است.</span></span></span><br> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول&shy;های اسپرماتوگونی بیضه&shy;ی بره&shy;ی نابالغ طی دو مرحله هضم آنزیمی جدا و به روش حذف تمایزی تخلیص شدند. این سلول&shy;ها به چهار گروه تقسیم و به مدت ۱۰ روز تحت تیمارهای مختلف قرار گرفتند. گروه شاهد (کشت ساده سلول&shy;های اسپرماتوگونی در محیط </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DMEM</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> حاوی 1 درصد آنتی&shy;بیوتیک و 5 درصد </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">FBS</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> که هیچ‌گونه تیماری را دریافت نکرد و گروه‌های 1، 2 و 3 که علاوه بر محیط بالا به ترتیب تحت تیمار با ۲۰، ۴۰ و ۸۰ میکروگرم بر میلی&shy;لیتر ویتامین </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">E</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> قرار گرفتند. تعویض محیط کشت هر 72 ساعت انجام شد و تعداد و قطر کلونی&shy;های تشکیل‌شده در روزهای ۴، ۷ و ۱۰ پس از کشت به‌وسیله‌ی میکروسکوپ معکوس بررسی گردید. شناسایی کلونی‌ها با استفاده از ایمنوسیتوشیمی آنتی‌ژن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PGP9.5</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> تائید گردید.</span></span></span><br> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج: </span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">میانگین تعداد و مساحت کلونی&shy;های اسپرماتوگونی در روزهای مختلف کشت در تیمارهای مختلف اختلاف معنی‌داری با گروه شاهد نداشت. میانگین مساحت کلونی‌ها در روز دهم به‌طور معنی‌داری بیشتر از روز چهارم بود (</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">05/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">P<</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">).</span></span></span><br> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج حاصل از این مطالعه نشان می‌دهد که افزودن ویتامین </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">E</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> به‌عنوان آنتی‌اکسیدان احتمالاً نقش چشمگیری در القا کلونی&shy;زایی سلول&shy;های بنیادی اسپرماتوگونی در کشت کوتاه‌مدت در محیط آزمایشگاه ندارد.</span></span></span><br> &nbsp;<br> &nbsp; <strong><em>Background & Objective:</em></strong> Spermatogonial stem cells (SSCs) are undifferentiated germ cells that maintain spermatogenesis during lifetime by balancing between self-renewal and differentiation. The aim of this study was to investigate the effect of different concentrations of vitamin E on spermatogonial stem cells colony formation.<br> <strong><em>Material & Methods:</em></strong> SSCs were isolated from testes of prepubertal lamb by two step enzymatic digestions then purified by differential pllating. The cells were cultured for 10 days in 4 groups. Control group: Basic media (DMEM environment which contains 1% antibiotic and 5% FBS<span dir="RTL">(</span> and treatment groups were treated with 20, 40 and 80 &micro;mol/ml vitamin E added to basic media respectively. Changing of culture media was performed every 72h. Colony number and diameter assay was done by inverted microscope. Identification of SSCs was performed by immunocytochemistry assay against PGP9.5.<span dir="RTL"></span><br> <strong><em>Results:</em></strong> there were no significant difference in colony number and surface area between treatment groups and between treatment and control groups in days 4, 7and 10. Colony surface area was significantly increased at day 10 compared to day 4 (P<0.05).<br> <strong><em>Conclusion:</em></strong> The results of this study showed vitamin E as an antioxidant doesn&rsquo;t have significant effect on colony induction of SSCs in short term culture in vitro.<br> <span dir="RTL"></span> سلول بنیادی اسپرماتوگونی, ویتامین E, محیط آزمایشگاه Spermatogonial Stem cell, Vitamin E, In-Vitro 1613 1620 http://jabs.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1898-1&slc_lang=fa&sid=1 Fateme Salehi فاطمه صالحی salehifateme48@gmail.com 3489815290 100319475328460019741 No Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, Iran دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران Ali-Asghar Moghaddam علی اصغر مقدم moghaddam@razi.ac.ir 12337987 100319475328460019742 Yes Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, Iran گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران Peyman Rahimi-Feyli پیمان رحیمی فیلی drp.rahimi@gmail.com 4501176199 100319475328460019743 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, Iran گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران